细胞培养生长不好的原因及解决方法?
可能原因:
1、细胞本身的状态 细胞传代次数多,细胞老化; 细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢; 细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长; 胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡; 细胞的冻存与复苏:慢冻速融。
2、污染 支原体污染; 霉菌污染。
3、培养基或血清 更换血清或培养基之前未进行验证; 选择的培养基是否合适; 培养基配制是否准确无误。
4、培养环境 CO2供应是否正常; 培养箱或摇床温度控制是否正确。
解决方法: 根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案(如下) :
1、注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;
2、避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);
3、要用合适的血清或培养基,最好经过验证;
4、注意实验室的环境。