MV-4-11 人髓性单核细胞白血病细胞

细胞名称:MV-4-11 人髓性单核细胞白血病细胞

货号：WS60150（STR鉴定）

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶

细胞介绍

MV-4-11细胞系由Rovera课题组建立，来源于一名患有人双表型髓性单核细胞白血病（biphenotypic B myelomonocytic leukemia）的10岁男孩的外周血。Interleukin (IL)-3可以独立地支持该细胞长期生长，使用10%FBS培养时则不需要额外添加IL-3。但是，在IL-3和生长因子Granulocyte/Macrophage Colony-Stimulating Factor （GM-CSF）均处于低浓度的情况下，IL-3会抑制MV-4-11细胞的增殖。

生长因子Granulocyte Colony Stimulating Factor（G-CSF）会协同GM-CSF促进MV-4-11细胞的增殖，而单独的G-CSF会短暂刺激该细胞系。据文献[PubMed: 3500218]报道，间接免疫荧光法检测髓性单核细胞抗原CD15，超过96%的该细胞为阳性，40~96%为单核细胞抗原CD4阳性，4-11%为单核细胞抗原CD10阳性。

一、细胞特性

1） 来源：男性，10岁 外周血

2） 形态：成淋巴细胞状，悬浮生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。 

二、运输和保存 

干冰运输及复苏好存活细胞 

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。 

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 

三、培养基及培养冻存条件准备 

1） 准备IMDM（推荐WS-P-0008）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗1%。

备注：

a) 该细胞为悬浮细胞，传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利，因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。如你收到的细胞为15ML离心管发货的细胞，请不要通过离心的方式收集细胞，可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液，然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。如你收到的细胞为T25培养瓶发货的细胞，通过离心收集细胞后，添加8-10ml按照要求配置的新鲜培养液然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。

后续建议您使用【半换液法】进行传代。

b) 细胞对血清质量较为敏感，我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。

c) 该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围。细胞接种密度20万个/mL ，培养时维持细胞密度在10万-100万个/mL。

血清我们推荐FBS500-WP-002

注：具体培养方式以随货说明书为准！！！！

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

四、传代方法

收到细胞后，在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

（一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，用力拍打瓶壁，期间每隔 5-10s放到显微镜下观察，直至50-70%的细胞脱落后，加入2ml 以上完全培养基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。

注：

1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。