15371470969
15371470969
细胞名称:RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞
货号：WS60172（STR鉴定）
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞介绍
该细胞来源于54岁白人男性。源于正常成人前列腺周边组织的上皮细胞经过转染HPV-18后建系得到该细胞株。在三维基质胶培养时，在雄激素作用下，RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA（kallikrein 3, KLK3）。来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2细胞株和 RWPE2-W99细胞株。同时，用N-甲醇-N-硝基脲处理RWPE-1，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株， 分别是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 细胞株。 据提供者报道，RWPE-1 细胞株经过检测，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。
一、细胞特性
1） 来源：前列腺正常细胞
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
二、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
三、培养基及培养冻存条件准备
1） 准备 角质细胞无血清培养基 (推荐：WS-0019培养基，包含两个组份：基础培养基1瓶+生长因子1管：1mL或者5mL两种）添加对应因子按照收到的生长因子对应规格：1mL加0.2%, 5mL 加1%，同时添加1% P/S 来培养细胞。或者 准备Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019) 来培养细胞。
备注:
1、Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培养液包含两个组份：基础培养基1瓶500mL（货号10785-012）+生长因子1管1mL ( 货号10784-015).
2、注意不要过滤完全培养基.
3、由于角质细胞无血清培养基或者Defined K-SFM为无血清培养液无法终止胰酶消化，所以消化完成后要通过添加2%FBS(用D-PBS稀释)终止消化并离心去除胰酶，再进行后续操作。无血清完全培养液建议添加抗生素一起培养。
4、该细胞贴壁性弱，建议使用Corning的cellbind细胞培养瓶(货号: 3289) 进行细胞培养。
血清我们推荐FBS500-WP-002
注：具体培养方式以随货说明书为准！！！！
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
四、传代方法
收到细胞后，在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
（一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，用力拍打瓶壁，期间每隔 5-10s放到显微镜下观察，直至50-70%的细胞脱落后，加入2ml 以上完全培养基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注：
1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。
