HET-1A 人食管上皮细胞

细胞名称:HET-1A 人食管上皮细胞

货号：WS60246（STR鉴定）

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶

细胞介绍

HET-1A 细胞系于 1986 年通过用由 RSV-LTR 启动子和编码猿猴病毒 40 大 T 抗原的序列组成的质粒 pRSV-T 转染从人食管尸检组织中衍生而来。生长因子研究表明，HET-1A 受钙刺激，受胎牛血清、转化生长因子-β1 和转化生长因子-β2 抑制。伏马菌素 B1 可抑制 HET-1A 细胞的生长并增加细胞凋亡。合成类视黄醇 CD437（6-[3-(1-金刚烷基)-4-羟基苯基]-2-萘甲酸 (AHPN/CD437)0）通过 caspase-3 依赖途径诱导食管鳞状 HET-1A 细胞凋亡。细胞核型位亚二倍体（34-40 条染色体），可用于研究假定的食道致癌物的作用。

一、细胞特性

1） 来源：黑人 男性 25岁 食管

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。 

二、运输和保存 

干冰运输及复苏好存活细胞 

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。 

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 

三、培养基及培养冻存条件准备 

1）准备准备BEGM kit培养基  (Lonza/Clonetics，CC-3170)备注：培养基包含（A+B），P/S双抗，1%。

A： BEBM 基础培养基  （货号CC-3171）       500ML

B:  细胞生长添加剂  （货号CC-4175）      一套（包含下列试剂）

● BPE, 2.0 ml ● Hydrocortisone, 0.5 ml    ● hEGF, 0.5 ml

● Epinephrine, 0.5ml  ● Insulin,0.5 ml      ● Transferrin, 0.5 ml

● Triiodothyronine, 0.5 ml ● Retinoic Acid, 0.5 ml ● GA, 0.5ml

ATCC 不使用 BEGM 试剂盒提供的 GA-1000（庆大霉素-两性霉素 B 混合物）。注意：

（1）不要过滤完全培养基。

（2）细胞传代在使用0.25%胰酶消化后，加入几倍体积的完全培养液稀释后（或者加入加入3-4ml用RPMI1640或者DMEM等基础培养基配置的含10%FBS）的培养基来终止消化，1000rpm/5min,去除胰酶后再加入细胞完全培养液进行传代培养。

（3） 细胞传代后贴壁性不佳，建议使用Corning的cellbind细胞培养瓶(货号: 3289) 进行细胞培养。

血清我们推荐FBS500-WP-002

注：具体培养方式以随货说明书为准！！！！

1）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。培养参考: 细胞消化时间15min左右 (0.25%胰酶)。传代比例1:2，传代周期3天左右

2）3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

四、传代方法

收到细胞后，在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

（一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，用力拍打瓶壁，期间每隔 5-10s放到显微镜下观察，直至50-70%的细胞脱落后，加入2ml 以上完全培养基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。

注：

1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。