MDA-MB-453 人乳腺癌细胞

细胞名称：MDA-MB-453 人乳腺癌细胞（含STR鉴定）

货号：WS60008

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶

一、细胞特性

1、 来源：乳腺；源自转移灶：心包积液

2、 形态：上皮细胞样，混合生长，贴壁与悬浮细胞同时存在。

3、培养基及培养冻存条件准备：

A.准备L15培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。                       

血清推荐WinSera   FBS500-WP-002

B.培养条件：气相：空气，100%；该细胞培养不能通入CO2， 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

 注意事项：

  a. 无CO2培养。如果没有条件准备空气气相100%的培养箱的，可以采用不透气密封盖的T25培养瓶来培养，培养过程中每天将细胞拿出培养箱换1-2次空气。

  b. 细胞形态是贴壁生长及悬浮生长混合，贴壁细胞形态是上皮样（立方形或多边形），但也有一些单个或成团的悬浮细胞。

  c. 细胞复苏后一段时间内，贴壁不牢，大部分细胞呈悬浮状态，悬浮细胞不要丢弃，换液或传代时可以将悬浮细胞收集离心后，重新加入细胞培养瓶中，继续培养。

C.冻存液：90%胎牛血清，10%DMSO 现用现配。

冻存液推荐WinSera  WS-1026-50ml/100ml

  储存：液氮储存

二、运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

1.复苏发货  a.T25瓶活细胞发货或 b.血清重悬发货
2. 冻存管发货(干冰发货)  

A.1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

B.T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

三、细胞接收后的处理

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。