15371470969
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细胞名称:C2C12 小鼠成肌细胞
货号：WS20012（种属鉴定）
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞介绍
这株细胞是D. Yaffe和O. Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆(由H. Blau等人构建)。C2C12细胞株可在低血清饥饿下分化，形成可伸缩的肌管并表达特征性的肌蛋白。如用骨形成蛋白2(BMP-2)处理后，分化途径从成肌细胞转换成成骨细胞。检测表明鼠痘病毒（ectromelia virus，ECTV）阴性。该细胞复苏后不耐受长时间运输，邮寄后会有细胞脱落、坏死等现象，有条件请选用干冰冷链快递或复苏后上门自取。通过本库诱导分化测试，在2%马血清刺激下可诱导分化形成肌纤维。
一、细胞特性
1） 来源: 组织： 肌肉 品系：C3H
2） 形态：成肌细胞 贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
二、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
三、培养基及培养冻存条件准备
1）准备DMEM（推荐WS-P-0002）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
备注：C2C12细胞生长较快，培养时细胞密度不可过高，否则容易分化,该细胞复苏后不耐受长时间运输，邮寄后会有细胞脱落、坏死等现象，有条件请选用干冰冷链快递或复苏后上门自取。收到邮寄活细胞的，收集上清离心后收集脱落的悬浮细胞和贴壁细胞一起建议T25培养瓶1：2传代培养。参考传代比例：根据细胞数量决定， 细胞密度应控制在 5000 – 15000 活细胞/平方厘米。传代周期2-3天，隔天换液。
血清我们推荐FBS500-WP-002
注：具体培养方式以随货说明书为准！！！！
1）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
2）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
四、传代方法
收到细胞后，在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
（一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，用力拍打瓶壁，期间每隔 5-10s放到显微镜下观察，直至50-70%的细胞脱落后，加入2ml 以上完全培养基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注：
1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。
