LWnt-3A 小鼠皮下结缔组织细胞

细胞名称:LWnt-3A 小鼠皮下结缔组织细胞

货号：WS20014（种属鉴定）

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶

细胞介绍

L Wnt-3A细胞是由L-M(TK-)细胞用Wnt-3A表达载体转染并在含G418的培养基中筛选出的稳转株。Wnt-3A基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。 

L Wnt-3A细胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A细胞是目前生产Wnt-3A条件培养基的最好来源。由于这种条件培养基还包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，对于涉及Wnt-3A条件培养基的实验有必要用其来源细胞株作对照。

一、细胞特性

1） 来源: 小鼠 皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪 品系：C3H/An

2） 形态：成纤维样，贴壁细胞

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。 

二、运输和保存 

干冰运输及复苏好存活细胞 

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。 

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 

三、培养基及培养冻存条件准备 

1）准备DMEM（推荐WS-P-0002）培养基89%； 优质胎牛血清10%；双抗，1%；G-418 0.4mg/ml。

血清我们推荐FBS500-WP-002

注：具体培养方式以随货说明书为准！！！！

1）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

2）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

四、传代方法

收到细胞后，在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

（一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，用力拍打瓶壁，期间每隔 5-10s放到显微镜下观察，直至50-70%的细胞脱落后，加入2ml 以上完全培养基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。

注：

1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。