细胞名称:AML12 小鼠肝细胞
货号:WS20086(种属鉴定)
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞介绍
此AML12(α小鼠肝脏12)细胞系由来自针对人TGFα的转基因小鼠(CD1菌株,品系MT42)的肝细胞建立。通过电子显微镜观察,这些细胞表现出典型的肝细胞特征,例如过氧化物酶体和胆小管样结构。AML12细胞保留表达血清(白蛋白,α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白)和间隙连接(连接蛋白26和32)蛋白的高水平mRNA的能力,并且仅含有乳酸脱氢酶的同工酶5。细胞表达高水平的人TGFα和较低水平的小鼠TGFα。
肝脏特异性蛋白质的表达在培养中随时间降低,但通过在无血清培养基中培养细胞而重新激活。
一、细胞特性
1) 来源: 小鼠,肝
2) 形态:上皮样细胞 贴壁生长
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
二、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
三、培养基及培养冻存条件准备
1)准备DMEM/F12培养基(推荐WS-P-0005)88% ;优质胎牛血清10%;ITS(胰岛素+转铁蛋白+硒)1%; Dexamethasone 地塞米松 40ng/ml;双抗,1%。
血清我们推荐FBS500-WP-002
注:具体培养方式以随货说明书为准!!!!
1)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
2)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
四、传代方法
收到细胞后,在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,用力拍打瓶壁,期间每隔 5-10s放到显微镜下观察,直至50-70%的细胞脱落后,加入2ml 以上完全培养基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注:
1、观察细胞最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。