细胞名称:A549/Adr 人肺癌细胞/阿霉素耐药株
货号:WS-014a(STR鉴定)
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
用途:仅供科研使用
一、细胞特性
该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系,患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。A549/Adr细胞为由A549细胞构建的耐Adr药物细胞株。
1、来源:肺癌
2、形态:上皮样 贴壁生长
二、培养基及培养冻存条件准备
1) 90%RPMI-1640+10%胎牛血清+100ng/ml Adr。
血清我们推荐 FBS500-WP-002
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二、 细胞处理
收到细胞后,在倒置镜下(最好是在 4X 物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内, 严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml 新鲜培养液后继 续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用 PBS(不含钙,镁离子)洗 1-2 次。 2. 加 0.7-1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,用力 拍打瓶壁,期间每隔 5-10s 放到显微镜下观察,直至 50-70%的细胞脱落 后,加入 2ml 以上完全培养基中止消化。 3. 按 6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养 瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注:1、观察细胞最好在低倍镜(4 或 5X 物镜)下进行,否则不能准确判 断细胞的传代密度。看细胞的形态请在 10X 或 20X 物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻 存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到 新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。