细胞名称:LEC-1仓鼠卵巢细胞
货号:WS10008(种属鉴定)
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
一、细胞特性
Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C,ATCC)是从脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑选出来的能抗麦芽凝集素的突变株。Lec1 缺乏称作GlcNAc-T1的糖基转移酶,从而N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。对于研究N-连接糖基化改变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的影响,这些细胞十分有用。
1) 来源:仓鼠卵巢
2) 形态:上皮细胞样,松散贴壁
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
二、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
三、培养基及培养冻存条件准备
1) 准备MEM a(推荐WS-P-0003)培养基;优质胎牛血清,20%;双抗1%。
血清我们推荐FBS500-WP-002
注:具体培养方式以随货说明书为准!!!!
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
四、 传代方法
收到细胞后,在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,用力拍打瓶壁,期间每隔 5-10s放到显微镜下观察,直至50-70%的细胞脱落后,加入2ml 以上完全培养基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注:
1、观察细胞最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。