细胞名称:143B人骨肉瘤细胞(含STR鉴定)
货号:WS60003
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
一、细胞特性
1、 来源:骨
2、 形态:混合型,成纤维与上皮样 贴壁生长
3、培养基及培养冻存条件准备:
A. 准备MEM 培养基 88 %,优质胎牛血清10 %,MEM NEAA非必需氨基酸 1%,P/S青霉素-链霉素1%
血清推荐WinSera FBS500-WP-002
B.培养条件:培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%
C.冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO 现用现配。
冻存液推荐WinSera WS-1026-50ml/100ml
储存:液氮储存
二、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
1.复苏发货 a.T25瓶活细胞发货或 b.血清重悬发货
2. 冻存管发货(干冰发货)
A.1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
B.T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
三、细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。