细胞名称:MDA-MB-435s人黑色素瘤细胞/人乳腺癌细胞(含STR鉴定)
货号:WS60007
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
一、细胞特性
1、 来源:黑素细胞,黑素瘤 以前认为是乳腺; 乳房; 导管; 导管癌; 胸腺渗出液
2、 形态:纺锤形 贴壁生长
3、培养基及培养冻存条件准备:
A.准备L15基础培养基89%;优质胎牛血清10%; P/S青霉素-链霉素 1%;牛胰岛素0.01mg/ml;谷胱甘肽(还原型) 0.01mg/ml
血清推荐WinSera FBS500-WP-002
B.培养条件:气相:空气,100%;该细胞培养不能通入CO2,如果没有条件准备空气气相100%的培养箱的,可以采用不透气密封盖的T25培养瓶来培养,培养过程中每天将细胞拿出培养箱换1-2次空气。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
C.冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO 现用现配。
冻存液推荐WinSera WS-1026-50ml/100ml
储存:液氮储存
二、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
1.复苏发货 a.T25瓶活细胞发货或 b.血清重悬发货
2. 冻存管发货(干冰发货)
A.1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
B.T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
三、细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。